Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук



жүктеу 1.82 Mb.
бет10/12
Дата10.09.2018
өлшемі1.82 Mb.
түріДиссертация
1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   12

Жирным шрифтом выделены аллели/генотипы и сочетания с ОШ>1

Б. Женщины

Аллели/генотипы в составе сочетания

Носители (%) /неносители (%) сочетания

Величина р

ОШ

(95% ДИ)

IL6

174G>C



*

PDE4D

41G>A

PDE4D

87C>T

TGFB1

915G>C

IFNG 874A>T

LTA

252G>A



















ИИ

n=77

Контроли

n=63







C/C










A




2(3)/73(97)

12(20)/48(80)

0.001

0.11(0.02-0.51)

G







G







72(93)/5(7)

47(76)/15(24)

0.0032

4.6(1.56-13.5)

G




C










52(67)/25(33)

29(47)/33(53)

0.01

2.36(1.18-4.72)




A










G

12(16)/65(84)

2(3)/61(97)

0.013

5.63(1.21-26.2)

G










T




46(61)/29(39)

25(42)/35(58)

0.017

2.22(1.11-4.44)

Жирным шрифтом выделены аллели/генотипы и сочетания с ОШ>1

В то же время, SNP −590C>T гена IL4 и 49A>G гена CTLA4 входят в состав сочетаний, ассоциированных с ИИ, только в общей группе, а 252А>G гена LTA - только у женщин. Наблюдаемые различия могут быть связаны с уменьшением размера выборок при разделении общей группы по полу, но это объяснение вряд ли подходит для полиморфизма гена LTA.

Данные, полученные при разделении выборки больных ИИ и контрольной группы в зависимости от возраста с последующим комплексным анализом (таблица 18) выявили, что аллели/генотипы полиморфного участка −174G>C гена IL6 входят практически во все предрасполагающие и протективные сочетания, ассоциированные с ИИ в возрастной группе старше 60 лет (таблица 18А). Комплексный анализ выявил у них следующие предрасполагающие к ИИ сочетания: IL6*−174G + TGFB1*915G (р=0.00088, ОШ=4.18, 95% ДИ: 1.75-9.95) и IL6*−174G + IFNG*874T (р=0.0036, ОШ=2.36, 95% ДИ: 1.3-4.3), причем первое сочетание выявлялось также в общей группе, а второе сочетание было выявлено у женщин. Таким образом, носительство этих сочетаний может рассматриваться как фактор риска ИИ. Как и в общей группе, наиболее мощным протективным сочетанием являлось сочетание IL6*−174C/C + IFNG*874A (р=0.00036, ОШ=0.17, 95% ДИ: 0.06-0.48). У лиц старше 60 лет также была выявлена отрицательная ассоциация с ИИ сочетаний IL6*−174C/C + TGFB1*−509T (р=0.00085, ОШ=0.13, 95% ДИ: 0.03-0.48) и IFNG*874A/А + TGFB1*869G (р=0.004, ОШ=0.37, 95% ДИ: 0.19-0.74), что касается последнего сочетания, то ни в общей группе, ни при разделении по гендерному признаку не была выявлена ассоциация с ИИ полиморфного участка TGFB1 869T>C. Также стоит отметить, что генотип TGFB1*−509T/Т был ассоциирован в общей группе с развитием ИИ как один (см. раздел 3.1), так и в составе сочетания. Таким образом, у лиц старше 60 лет наибольшее значение в развитии ИИ играют полиморфизм −174G>C гена IL6, как и в общей группе, и полиморфизм 874A>T гена IFNG. У лиц с ранним ИИ (моложе или равном 60 лет) (таблица 18Б), в отличие от общей группы, мы не

Таблица 18. Ассоциация ИИ с носительством сочетаний аллелей и генотипов SNP исследованных генов в разных возрастных группах

А. Лица в возрасте старше 60 лет


Аллели/генотипы в составе сочетания

Носители (%) /неносители (%) сочетания

Величина р

ОШ

(95% ДИ)


IL6

174G>C



*

TGFB1

509С>Т



TGFB1

915G>C

TGFB1

869T>C


IFNG 874A>T

*
















ИИ

n=133

Контроли

n=76







С/C










A

6(5)/122(95)

15(22)/54(78)

0.00036

0.17(0.06-0.48)

C/C

T










3(2)/130(98)

11(15)/62(85)

0.00085

0.13(0.03-0.48)

G




G







124(93)/9(7)

56(77)/17(23)

0.00088

4.18(1.75-9.95)

G










T

86(67)/42(33)

32(46)/37(54)

0.0036

2.36(1.3-4.3)










С

A/A

21(16)/107(84)

24(34)/46(66)

0.004

0.37(0.19-0.74)

Жирным шрифтом выделены аллели/генотипы и сочетания с ОШ>1

Б. Лица в возрасте не старше 60 лет

Аллели/генотипы в составе сочетания

Носители (%) /неносители (%) сочетания

Величина р

ОШ

(95% ДИ)


PDE4D41G>A

*

PDE4D87C>T

TGFB1−509С>Т










ИИ

n=67

Контроли

n=70







G/G




C

38(57)/29(43)

56(81)/13(19)

0.002

0.30(0.14-0.66)

A

C




17(25)/50(75)

6(9)/63(91)

0.008

3.57(1.31-9.72)




C

T/T

8(12)/59(88)

1(2)/69(98)

0.014

9.35(1.14-77.03

Жирным шрифтом выделены аллели/генотипы и сочетания с ОШ>1

наблюдали ассоциированных с ИИ сочетаний, включающих аллели или генотипы полиморфного участка −174G>C гена IL6.

Основной вклад в предрасположенность к ИИ у лиц данного возраста по нашим данным вносят полиморфизмы 41G>A и 87C>T гена PDE4D и −509С>Т гена TGFB1. С риском развития ИИ ассоциированы сочетания: PDE4D*41А+ PDE4D*87С (р=0.008, ОШ=3.57, 95% ДИ: 1.31-9.72) и PDE4D*87С + TGFB1*−509T/T (р=0.014, ОШ=9.35, 95% ДИ: 1.14-77.03). Ассоциация сочетания PDE4D*41А + PDE4D*87С с ИИ наблюдалась также у мужчин, а сочетание PDE4D*87С + TGFB1*−509T/T было ассоциировано с развитием ИИ в общей группе. Протективными для развития ИИ в подгруппе ≤60 лет является сочетание PDE4D*41G/G + TGFB1*509C(р=0.002, ОШ=0.30, 95% ДИ: 0.14-0.66). В общей группе мы наблюдали протективное сочетание PDE4D*41G + TGFB1*−509C (р=0.002, ОШ=0.36, 95% ДИ: 0.17-0.73).

Как и в случае разделения больных и контролей по полу, при их разделении по возрасту сохраняются некоторые закономерности распределения отдельных аллелей/генотипов в составе сочетаний, обнаруженные в общей группе. SNP −174G>C гена IL6, −509С>Т и 915G>C гена TGFB1 и 874A>T гена IFNG входят в состав ассоциированных с ИИ сочетаний как в общей группе, так и в подгруппе старше 60 лет, а 41G>A и 87C>T гена PDE4D и 915G>C гена TGFB1 - в общей группе и в подгруппе до 60 лет включительно. При этом SNP −590C>T гена IL4, 49A>G гена CTLA4 и −308A>G гена TNF выявлены в составе ассоциированных с ИИ сочетаний только в общей группе. Интересно, что первые два SNP не входили в состав составных маркеров и в подгруппах мужчин и женщин.

Обращают на себя внимание существенные различия в распределении SNP, входящих в состав сочетаний, ассоциированных с ранним и более поздним ИИ. Если в возрастной группе ≤60 лет включительно с ИИ ассоциированы сочетания, несущие аллели SNP 41G>A и 87C>T гена PDE4D, а также 509С>Т гена TGFB1, то в группе старше 60 это оказались аллели SNP −174G>C гена IL6, 509С>Т, 869T>C и 915G>C гена TGFB1 и 874A>T гена IFNG. Единственный SNP, входящий в состав сочетаний, ассоциированных с развитием ИИ в обеих возрастных группах - это −509С>Т гена TGFB1, однако при этом аллель TGFB1*−509Т входит в состав разнонаправлено ассоциированных сочетаний.

Следует отметить, что при разделении больных ИИ и контрольной группы по полу и возрасту, как и в общей группе, соблюдается закономерность: аллель полиморфного участка, входящий в протективное сочетание, является альтернативным для аллеля из предрасполагающего сочетания.

В целом, анализ совместного вклада в предрасположенность к ИИ сочетаний аллелей или генотипов исследуемых генов позволил увеличить число генов, влияющих на восприимчивость к ИИ, с 4 до 8. Действительно, если объединить результаты всех проведенных сравнений, ассоциация ИИ с аллелями генов IL6, PDE4D, TGFB1 и IFNG была показана как поодиночке (см. таблицу 14), так и в составе сочетаний, тогда как аллели генов CTLA4, IL4, TNF и LTA были ассоциированы с ИИ только в составе сочетаний. При этом важно отметить, что из последних только в случае гена LTA его аллель LTA*252G входил в состав предрасполагающих сочетаний, а аллели остальных генов были компонентами протективных сочетаний.

В таблице 19 представлены сводные данные об аллелях риска, выявленных нами в составе сочетаний при различных типах сравнения больных ИИ и индивидов контрольной группы (общие группы, только мужчины, только женщины, отдельно лица не старше 60 лет и лица старше 60 лет). Данные этой таблицы полностью подтверждают выводы об индивидуальных аллелях риска, которые были сделаны для аналогичных групп сравнения (см. таблицу 14). Более того, они свидетельствуют о повышении мощности анализа при использовании комплексного подхода, основанного на анализе сочетаний генов. Действительно, ряд аллелей выявлен в сравниваемых подгруппах в составе значимых предрасполагающих сочетаний (выделены жирным), тогда как при анализе поодиночке для них не был достигнут уровень значимости. Особое положение в этой таблице занимает аллель риска LTA*252G, который был выявлен только в составе сочетания при комплексном анализе в подгруппе женщин.



Таблица 19. Аллели риска, выявленные в составе сочетаний при сравнении больных ИИ и индивидов контрольной группы: общих групп, только мужчин, только женщин, отдельно лиц не старше 60 лет и лиц старше 60 лет

Полиморфизм

Аллель риска ИИ

Общие группы

Мужчины

Женщины

Лица не старше 60 лет

Лица старше 60 лет

IL6 −174G>C

G

+

+

+




+

PDE4D 41G>A

A




+

+

+




PDE4D 87C>T

C

+

+

+

+




TGFB1 −509С>Т

Т

+







+




TGFB1 915G>C

G

+

+

+




+

IFNG 874A>T

Т







+




+

LTA 252 G>A

G







+







Примечание: «+» показывает, при каком типе сравнения больных ИИ и индивидов контрольной группы выявлен аллель риска. Без выделения цветом показаны аллели риска, которые были выявлены также поодиночке (представлены в таблице 14), цветом выделены аллели риска, выявленные только в составе сочетаний.
В целом, проведенный нами комплексный анализ показал, что аллель IL6*−174G и генотип IL6*−174G/G полиморфизма −174G>C гена IL6 вносят существенный вклад в наследственную предрасположенность к ИИ во всех подгруппах, кроме лиц не старше 60 лет. Наши данные о значимости этого аллеля/генотипа совпадают с результатами [127, 192, 372], полученными для европеоидов. Полиморфизм −174G>C влияет на продукцию IL6. Показана ассоциация носительства генотипа IL6*–174G/G с более высоким, а аллеля IL6*–174C – с более низким уровнем IL-6 в плазме крови [126, 386], однако в ряде аналогичных работ различия не достигали уровня значимости. Известно, что повышение продукции IL-6 вызывает нарушение взаимодействия гладкомышечных клеток в стенке сосуда с клетками иммунной системы, что в конечном итоге приводит к усилению атерогенеза [242]. Кроме того, IL-6 обладает нейротрофическим действием при церебральной ишемии [356].

В результате проведенного комплексного анализа нами были выявлены позитивные и негативные ассоциации с ИИ обоих исследованных полиморфных участков гена PDE4D в составе сочетаний – в общей группе и во всех подгруппах, кроме лиц старше 60 лет. Ранее позитивные ассоциации однонуклеотидных полиморфизмов в гене PDE4D с инсультом были показаны на выборках из неевропейских стран [69, 84, 277]. Выявленная в этих исследованиях роль гена PDE4D в формировании риска развития ИИ носила самостоятельный характер и не зависела от таких факторов риска как возраст и пол [72, 239, 264, 409]. Данные о позитивной ассоциации с аллелем PDE4D*41A были получены ранее в исследовании на несколько иной выборке – у больных острым инсультом из московской популяции [10].

Комплексный анализ выявил существенный вклад в развитие ИИ генотипа риска TGFB1*−509T/T в общей группе и в подгруппе лиц не старше 60 лет; соответственно, аллель TGFB1*−509С был обнаружен во многих протективных сочетаниях. Подобная ассоциация наблюдалась в голландской [344] и китайской [295] популяциях. Как было сказано выше, носительство генотипа TGFB1*−509T/T ассоциировано с более высоким содержанием триглицеридов в плазме крови [295] и может способствовать росту атеротромботической бляшки, что в свою очередь может приводить к сужению просвета сосудов и развитию ишемических процессов. Также был выявлен вклад в развитие ИИ и предрасполагающая роль генотипа TGFB1*915G/G в подгруппе мужчин, также данный генотип входил в состав сочетаний с аллелями полиморфных участков −174G>C гена IL6 и 87C>T гена PDE4D общей группы. Кроме того, в сочетании с аллелем IL6*–174G, генотип TGFB1*915G/G играл предрасполагающую роль у мужчин и у лиц старше 60 лет, а аллель TGFB1*915G был положительно ассоциирован с ИИ у женщин, соответсвенно, аллель TGFB1*915C в сочетании TNF*−308G был негативно ассоциирован с ИИ у мужчин. Полученные данные соответствуют результатам исследования на китайской популяции, где показана ассоциация генотипа TGFB1*915G/G с мерцательной аритмией, являющейся одним из факторов ИИ [390]. Что касается полиморфного участка 869C>Т, то его аллелей мы не наблюдали в составе предрасполагающих сочетаний ни в общей группе, ни при разделении по гендерному признаку. Однако, аллель TGFB1*869C входил в состав протективного сочетания с IFNG*874А/А у лиц, получивших инсульт в возрасте старше 60 лет, что согласуется с данными исследования китайской популяции [295].

Мы наблюдали, что аллель IFNG*874T входит в состав предрасполагающих к развитию ИИ сочетаний как в группе старше 60 лет, так и у женщин, а в качестве индивидуального аллеля риска был выявлен для индивидов старше 60 лет. Вовлечение в формирование предрасположенности к ИИ участка IFNG*874A>T, по-видимому, выявлено нами впервые: в опубликованной литературе мы не нашли других работ, посвященных анализу связи с ИИ этого полиморфного участка. Однако, по мнению некоторых исследователей у пациентов с артериальной гипертензией 3 степени (АГ III), перенесших ИИ, совместно с выработкой IL-6 наблюдалась гиперсекреция IFNγ, и данная комбинация является наиболее опасной для развития воспалительных процессов [14]. Из указанных выше данных о влянии аллелей на уровень продукции IFNγ [182, 301], можно предположить, что носительство аллеля IFNG*874T усиливает в бляшке синтез коллагена, что приводит к увеличению ее размера.

Проведенный комплексный анализ не выявил позитивной ассоциации носительства того или иного аллеля/генотипа SNP − 308A>G гена TNF с развитием ИИ, однако, нами была обнаружена негативная ассоциация с ИИ данного полиморфного участка в составе протективных сочетаний в общей группе и в подгруппе мужчин. Обнаруженная нами негативная ассоциация аллеля TNF*−308G согласуется с данными, полученными для греческой популяции [254], но не для венгерской популяции, где была показана протективная роль аллеля TNF*−308A [160]. Этот вопрос нуждается в дальнейшем исследовании.

Мы наблюдали также присутствие аллеля IL4*−590C в общей группе в составе протективных сочетаний с аллелями и генотипами полиморфных участков других генов. Как уже указывалось, в литературе мы не обнаружили аналогичных данных; при этом в исследовании на греческой популяции была выявлена роль альтернативного IL4*−589T аллеля с рецидивами инсульта [255].

Мы не обнаружили в составе сочетаний, ассоциированных с ИИ, полиморфного участка 252A>G гена LTA c ИИ ни в общей группе, ни в обеих возрастных группах, что, впрочем, согласуется с данными ряда других работ, например, для немецкой и японской популяций [136, 155]. В то же время, в иследовании на венгерской популяции было показано, что аллель LTA*252G служит фактором риска для развития ИИ [358]. С этим заключением согласуются полученные нами данные об ассоциации аллеля LTA*252G в составе сочетания с риском развития ИИ у женщин.




Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   12


©kzref.org 2019
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет