разделения белков сыворотки крови. Добавление незначительного
количества нейтраль-
ных солей повышает растворимость белков.
Осаждение солями тяжелых металлов. Ионы тяжелых металлов (Pb
2+
, Hg
2+
, Fe
2+
, Fe
3+
,
Zn
2+
, Cd
2+
) вызывают осаждение белков. Металлы имеют положительный заряд и в ще-
лочной среде вызывают преципитацию белков.
Осаждение анионами или алкалоидными реактивами. Белки осаждаются трихлоруксус-
ной кислотой, сульфосалициловой кислотой, пикриновой кислотой, таниновой кислотой.
Белки являются катионами и добавление анионов кислот
приводит к образованию ком-
плексов белок-анион.
4. Электрофорез белков. В методе электрофореза белков сыворотки используют слабоще-
лочные буферные растворы с рН > pI, чаще всего с рН около 8,6. При этом белки заряжа-
ются отрицательно и перемещаются к аноду.
В среде с постоянной вязкостью и напряжением движение заряженной частицы определя-
ется величиной отношения заряда к радиусу частицы. С увеличением этого отношения
подвижность частиц растет. Если частицы близки по радиусу, то их электрофоретическая
подвижность будет пропорциональна заряду.
5.
Денатурация - разрушение третичной и частично вторичной структуры белка с сохранением
первичной структуры, т. е. потеря нативной структуры. Денатурация отличается от гидролиза белка
тем, что при гидролизе необратимо разрушается первичная структура путем разрыва пептидных
связей.
В зависимости от степени денатурации потеря биологической активности может быть
частичной или
полной.
При денатурации
изменяются физические свойства белка, например,
снижается рас-
творимость и белок выпадает в осадок, поскольку теряются основные факторы устойчи-
вости - заряд и гидратная оболочка. Если после удаления денатурирующего агента вос-
станавливается нативная структура белковой молекулы, это называется
ренатурация (ре-
нативация).
При
денатурации первичная структура не изменяется, т.е. не
происходит разрыва
пептидных связей.
Денатурированные под действием соляной кислоты белки в желудочно- кишечном
тракте более легко
перевариваются под действием пищеварительных ферментов.
Факторы,
вызывающие денатурацию
:
Химические факторы: сильные кислоты или щелочи, органические растворители, детер-
генты, восстанавливающие агенты,
концентрированные соли, тяжелые металлы.
Физические факторы: температура, давление, механическое воздействие, ультразвуковое
и ионизирующее излучение.