Правила этического обращения с лабораторными животными при проведении экспериментальных работ в научном центре биомедицинских технологий


Современные тенденции оценки биомедицинской безопасности



жүктеу 2.59 Mb.
бет16/21
Дата18.02.2019
өлшемі2.59 Mb.
түріПравила
1   ...   13   14   15   16   17   18   19   20   21

Современные тенденции оценки биомедицинской безопасности

Международное научное сообщество находится в активном поиске новых путей оценки биомедицинской безопасности с использованием как новых перспективных моделей животных-млекопитающих, так и альтернативных моделей. Практически ежегодно осуществляется пересмотр и ревизия новых методов исследования и оценки безопасности веществ и материалов. Это тем более важно, что последние достижения в области нанотехнологий выявили неготовность биомедицинских технологий в этом направлении. Требуется создание единого информационного ресурса по вопросам безопасности наносубстанций, наномедпрепаратов и нановакцин, а так же накопление и учет физико-химической, токсиколого-гигиенической, эколого-токсикологической информации об исследованных наносубстанциях, нанопрепаратах и нанолекарствах.

В настоящее время в России пока отсутствуют учреждения, проводящие доклинические исследования, полностью соответствующие и аккредитованные по международной системе GLP. Несмотря на введение с марта 2010 года в действие Национального стандарта Российской Федерации «Принципы надлежащей лабораторной практики – GLP» (ГОСТ Р 53434-2009), в стране отсутствуют единые принципы и требования проведения доклинических исследований, гармонизированных с международными стандартами. Поэтому мы сочли необходимым отразить в нашем Руководстве некоторые важнейшие принципы и подходы, соответствующие мировым тенденциям.

Определяющим принципом при оценке биомедицинской безопасности лекарств, вакцин и других веществ и материалов является минимизация количества животных при исследовании химических, биологических или минеральных соединений. Общепринятый прием оценки LD50 в соответствии с Системой глобальной гармонизации (Globally Harmonised System – GHS), предусматривает интервалы достоверности, ранжирования и классификации субстанции. Базовым методом является процедура фиксированной дозы, с общепринятым обозначением TG 420 (Test Guideline, Руководств по тестам), для условий перорального введения веществ.

Острая токсичность – это когда введенное в однократной или многократных дозах в течение 24 ч вещество нарушает функции, морфологическую картину органов, гибель животных.

В соответствии с тестом TG 420 в исследование включают группы животных, предпочтительно одного пола, обычно самок, получающих дозы препарата в ступенчатой процедуре. Предпочтительный вид грызунов – крыса, которой проверяемая субстанция вводится в одинарной дозе через желудочный зонд. Допускается дробное введение субстанции небольшими частями, в течение периода, не превышающего 24 часа. Используются фиксированные дозы по 5, 50, 300 и 2000 мг/кг, а в отдельных случаях может быть исследована доза в 5000 мг/кг.

Первоначальный уровень дозы выбирают, исходя из ожидаемого уровня, при котором наблюдаются сразу несколько симптомов токсичности без причинения явных эффектов отравления или летального исхода, и основанного на данных in vivo или in vitro. Если такой информации нет, то стартовая доза принимается равной 300 мг/кг. Следующие группы животных могут получать более высокие или низкие дозы, в зависимости от наличия или отсутствия симптомов отравления. Эта процедура продолжается до тех пор, пока не будет определена доза, вызывающая отравление.

Животные наблюдаются ежедневно в течение 14 дней, в течение которых фиксируются изменения кожи и меха, глазных и слизистых мембран, дыхательной, кровеносной, вегетативной и центральной нервной системы, соматомоторной активности и поведения особей. Отмечается явление тремора, конвульсий, слюноотделения, диареи, летаргии, сонливости и комы. В эксперименте должны быть учтены принципы и критерии, включенные в документ «Human Endpoints Guidance Document». Вес каждого конкретного животного, включенного в эксперимент, должен быть определен до и после введения субстанции. Обязательным условием должно быть проведение патоморфологических исследований.



Использование мини-свиней в оценке биомедицинской безопасности

Биоэтическая парадигма ориентирует на ограничение использования в биомедицинских технологиях целого ряда животных (обезьяны, собаки и т.д.) и поиску других животных-моделей.

В начале 1990-х гг. мини-свиньи были введены в эксперименты по токсикологии как альтернатива видам не грызунам. Основной причиной для введения была реализация многих биохимических, анатомических и физиологических черт, схожих с человеком, относительно других видов не грызунов. Мы считаем необходимым дать более подробную характеристику использования мини-свиней, как принятых в международной биомедицинской практике животных-моделей.

Фармакокинетические исследования легко проводятся на мини-свиньях с повторяющимся забором образцов крови или образцов других видов жидкостей из тела или тканей.



Администрирование доз и техника взятия проб – это оральные процедуры с использованием желудочного зонда или дозировки диеты с добавлением медикаментов в корм. Дозирование с помощью желудочного зонда у конвенциональных животных может вызвать стресс у животных. В виду анатомических и физиологических сходств кожи у человека и мини-свиньи весьма полезны для исследований кожи. Эта процедура используется в токсикологических исследованиях кожи для острой токсичности и в процедуре повторяющихся доз, исследованиях дермальной абсорбции, исследованиях фототоксичности и исследованиях фоточувствительности. Парентеральные дозы могут быть применены в виде инъекций внутримышечно, подкожно, внутрикожно и внутривенно. Последнее может быть выполнено или с помощью введения большого количества жидкости (болюсов), или как продолжающиеся внутривенные инфузии. Детально продолжающиеся внутривенные инфузии были описаны, также как и хирургическая подготовка для применения продолжающихся внутривенных инфузий. Другие процедуры, такие как носовые дозировки или дозировки ингаляций также были успешно применены на мини-свиньях.

Наблюдения, требуемые в тестах на токсичность, такие как клинические симптомы, вес тела, офтальмоскопия и электрокардиография являются рутинными процедурами в тестах на токсичность, проводимых на мини-свиньях.



Репродуктивная токсикология. Как известно, в тестах на репродуктивную токсичность обычно используют два вида животных: грызуны и не грызуны. Обычно используют крыс и кроликов. Мини-свиньи могут быть альтернативным видов в тератогенетических и репродуктивных исследованиях, когда традиционные виды, такие как мыши, крысы, кролики, являются неподходящими. Нечеловекообразные обезьяны имеют ограничения по количеству и сохранности и, главным образом, из-за того, что они приносят только одного детеныша. Мини-свиньи соответствуют SPF-стандартам, относительно недороги и имеют сходные с человеком анатомические и физиологические особенности. Репродуктивные характеристики светлогорских мини-свиней были описаны совместно с протоколом тератогенетических тестов и записями контрольных данных. Протокол тестирования может быть кратко описан следующим образом. Половой зрелости светлогорские мини-свиньи достигают в 8-месячном возрасте. Обычно самый хороший возраст для включения в эксперимент 8-12 месяцев. Тератогенетические исследования длятся от начала имплантации (день 11) до закрытия жесткого нёба (день 35), включая беременность.

Могут быть использованы различные процедуры наблюдения. Наиболее широко применяют оральные процедуры, но может быть также применена процедура продолжающихся внутривенных вливаний. Беременность может контролироваться ультрасонографией на 4-5 неделе беременности. Свиней забивают на 110-112 день беременности. Так как вес плода составляет 300-450 г, возможно, провести полную аутопсию эмбрионов. Обычно протокол включает эмбриональные исследования после изъятия из матки и окраску скелета. Для изучения скелета можно добавить рентген, так как кости скелета и плотность костей лучше визуализируются, чем при окрашивании ализарином. Сетлогорские мини-свиньи весьма подвержены тератогенетическим эффектам третиноина с пороками развития, похожими на тератогенетический эффект ретиноловой кислоты у людей.

Светлогорские мини-свиньи полезны как модель изучения эффектов мужского оплодотворения. Показано, что самцы мини-свиней более подвержены химическим воздействиям с побочными (вредными) эффектами на способность оплодотворения, чем самцы крыс. Мини-свиньи имеют большее сходство с человеком в норме оплодотворения, проценте морфологически ненормальной спермы, проценте спермы со способностью к движению и вероятностью крипторхизма.

Ювенильные исследования были введены в доклинические программы, так как некоторые лекарства являются проблемными для детей без проверки безопасности их использования в аналогичной возрастной группе. Стандарт доклинических исследований должен включать профиль безопасности для всех педиатрических групп, особенно в реакциях развивающегося мозга, дыхательной системы, почек, репродуктивной и иммунной систем. Это послужило мотивировкой в США и Евросоюзе по разработке руководства для доклинических исследований на ювенильных животных для фармацевтики педиатрических показателей. Традиционно, крысы и собаки, но не свиньи являлись видами, выбираемыми для исследований.

Оценка годности мини-свиней для такого рода исследований была проведена учеными разных стран. Протоколы для проведения ювенильных исследований включают подсадку всех животных к одной матери для того, чтобы избежать эффекта случайности. Подсадка молодняка мини-свиней для подготовки ювенильных токсикологических исследований является важной практикой подготовки для последующего содержания в лаборатории тестирования. На ювенильных мини-свиньях проводят такие исследования, как оральное или парентеральное дозирование, офтальмоскопия, ЭКГ и повторяющийся забор проб крови для клинической патологии и токсикокинетики. Имплантация венозных портов для ежедневной внутривенной дозировки была удачной, начиная с 7 дня и далее. Клинико-патологические данные очень важны, так как многие стандартные параметры изменяются с возрастом.



Правовые вопросы. Свиньи и мини-свиньи, как модель в тестах на токсичность фармацевтических и других химических веществ, в настоящее время принята в Японии, ЕС и США. Свиньи и мини-свиньи особенно упоминаются как потенциальный вид не грызунов в руководствах Японии и Канады. Свиньи и мини-свиньи внесены в руководство OECD 409.

Таким образом, мини-свиньи являются полезным видом не-грызунов в исследовании безопасности лекарств. Однако, отбор наиболее подходящих видов, является комплексным. Многие фармацевтические предприятия содержат собак, как первый выбор и исходят от собак при своих оценках. Мини-свиньи могут быть коммерчески неподходящими животными в основном из-за живого веса, так как они требуют большего количества тестов. Светлогорские мини-свиньи выращиваются в соответствующих условиях, которые обеспечивают в результате должный иммунологический статус. Реальной отдачей для фармакологии и токсикологии является то, что выбор мини-свиней для оценки лекарств имеет биоэтические, аллометрические, таксономические и экстраполяционные преимущества.




Каталог: doc
doc -> Английские слова и выражения в оригинальном написании a horse! a horse! MY KINGDOM FOR a horse! англ букв. «Коня! Коня! Мое царство за коня!»
doc -> Викторина по пьесе В. Шекспира «Гамлет, принц Датский»
doc -> Егемен Қазақстан. – 2014. №176. – 10 қыркүйек Біржан С. Елім менің – Қазақстан
doc -> Республиканский форум «Технологические инновации библиотек для информационного общества», Усть-Каменогорск, 10-11 октября 2012 г
doc -> Әож 373. 016;821. 512. 122 Қолжазба құқығында
doc -> Тест сынып Ұлы Отан соғысы нұсқа


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   13   14   15   16   17   18   19   20   21


©kzref.org 2019
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет