Правила этического обращения с лабораторными животными при проведении экспериментальных работ в научном центре биомедицинских технологий



жүктеу 2.59 Mb.
бет8/21
Дата18.02.2019
өлшемі2.59 Mb.
түріПравила
1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   ...   21

Категорирование животных

Получение надежных и воспроизводимых результатов медико-биологического эксперимента можно достигнуть лишь при соблюдении стандартности всех его слагаемых и условий проведения. В этом смысле лабораторное животное является наиболее уязвимым звеном в системе медико-биологического эксперимента. Его состояние как живого объекта, зависит от воздействия многочисленных как экзогенных, так и эндогенных факторов, влияние которых далеко не всегда бывает явным и легко регистрируемым. Среди них, прежде всего, следует отметить факторы инфекционной и инвазионной природы. Причем различные, в том числе даже патогенные представители вирусной и бактериальной флоры, не всегда вызывают клинически явную картину заболевания. Часто они протекают в латентной форме или же в виде носительства. В настоящее время актуальность приобретает так называемая оппортунистическая, эндогенная инфекция, активизирующаяся при иммунодефицитных состояниях.



Классификация животных-моделей

Достижение современного уровня медико-биологического исследования возможно лишь при унификации всех факторов, воздействующих на организм лабораторных животных путем строгой стандартизации, как условий содержания, так и самих животных. Введение в мировую практику требований системы GLP (Good Laboratory Practice) для проведения доклинических испытаний лекарственных веществ предъявило еще более жесткие условия к проблеме стандартизации животных, состоянию их здоровья.

Основой этих критериев является принцип недопустимости носительства ряда патогенных и условно-патогенных агентов инфекционной и инвазионной природы: вирусов, бактерий, паразитов. Во многих странах разработаны стандарты различных категорий качества животных по состоянию здоровья. Они включают перечень возбудителей, носительство которых исключается. Чем выше категория качества животного, тем больше перечень недопустимых агентов. Однако, стандарты различных стран не идентичны. Единой международной классификации лабораторных животных по категориям качества и соответствующих стандартов не существует. В связи с этим, животные, именуемые как SPF (Specific pathogen free), не имеют четкой характеристики качества, и, полученные из разных источников, могут значительно различаться по своему статусу. В последние годы отмечается явная тенденция к унификации критериев качества животных и создания единых стандартов. Примером могут служить разработки группы исследователей европейских стран: GV-SOLAS, FELASA.

Специалисты нашей страны совместно с зарубежными коллегами на основе мирового опыта также предприняли попытку создания требований к качеству лабораторных грызунов различных категорий, которые были приняты в 1989 г. на совместном совещании в Софии. Однако опыт работы по контролю состояния здоровья животных позволил видоизменить эти нормативы (Таблица ).


Таблица 0

Классификация лабораторных животных по категориям и их использование в биомедицинских исследованиях

Категория

Характеристика

Метод получения

Барьер

Контроль

Использование

1

Конвенциональные (CV)

Случайный

Отсутствует (открытая система)

Стандарт 1 категории

В целях обучения (острые опыты)

2

Улучшенные конвенцио-нальные(MD или Minimal Deseases)

От животных более высокой категории качества

Неполная барьерная система

Регулярный по стандарту 2 категории.

Рутинные исследования в кратковременных экспериментах

3

SPF (СПФ или свободные от патогенной флоры)

От животных, содержащихся в изоляторах и ассоциированных с определенными микроорганизмами

Барьерная система

Регулярный по стандарту 3 категории

Изготовление стандартных препаратов, испытание на токсичность препаратов Хронические эксперименты длительностью 6 мес.

4

SPF или СПФ Максимально свободные от условно-патогенной флоры

От гнотобиотных или безмикробных животных, ассоциированных с определенными микроорганизмами

Барьерная система высокой степени надежности

Регулярный по стандарту 3 категории, с использованием ПЦР

Получение культур клеток при производстве вакцин, поддержание штаммов бактерий и вирусов перевиваемых опухолей, испытание новых фармакологических средств, проведение фундаментальных исследований иммунитета, воспаления и т.д.

5a

Безмикробные (аксенные GF)

Гистерэктомия Свободный от любой или известной формы жизни микроорганизмов

Изолятор

Регулярный на наличие ассоциированных микроорганизмов

5b

Гнотобиотные (категории GFX)

Используются для описания животных и систем, все формы жизни в которых известны

Изолятор со специальным контролем

Регулярный, с использованием ПЦР и др. специальных методов контроля

Классификация основана на методе получения исходных для разведения животных, наличии и надежности барьера и глубине или уровне контроля статуса животного по соответствующему стандарту (требованию). Предлагается различать 5 категорий качества животных: конвенциональные, содержащиеся в открытой системе (категория 1); улучшенные конвенциональные, находящиеся в барьерной системе неполного типа. Исходными животными этой категории могут быть только животные более высокого класса качества (SPF). Эта категория качества животных соответствует категории, именуемой во многих странах MD (Minimal Deseases), или (категория 2); а также категории – SPF животные, содержащиеся в строгой барьерной системе (категория 3); гнотобиоты и 4) безмикробные или аксенные животные, содержащиеся в изоляторах (категории 4, 5a и 5b).



SPF – животные биомодели

Конвенциональные животные являются животными-носителями различных неизвестных микроорганизмов. Такие животные могут содержаться как в стерильных, так и в обычных условиях и являются потенциальными носителями патогенов.

Обычные лабораторные животные, используемые в биомедицинских исследованиях – просто здоровые особи. Использовать в исследованиях животных-гнотобиотов практически невозможно ввиду их чрезвычайной дороговизны, объяснимой необходимостью его содержания в изоляторе.

Противоположностью этому являются SPF-животные, которые, с одной стороны, являются носителями целого ряда неизвестных видов микроорганизмов, но, с другой, – свободно от одного или нескольких специфических патогенных микроорганизмов.

SPF-животные, микробиологический статус которых подтвержден, являются более экономичной альтернативой гнотобиотам. Однако гнотобиотные технологии представляют наилучший способ развития базовой линии SPF-животных.

Производство SPF-животных выглядит следующим образом. Первоначально безмикробных животных, с неразвитой системой иммунной защиты, ассоциируют с «коктейлем» аэробных и анаэробных микробов-симбионтов. Эта непатогенная микрофлора способствует развитию системы иммунной защиты, которая в свою очередь позволяет животным выжить вне изолятора в условиях обычного содержания. Ожидается, что животное получит из окружающей среды дополнительно некоторые непатогенные организмы, что завершит или стабилизирует кишечную флору.

Здоровью колоний лабораторных животных постоянно угрожают инфекции. Невозможно ограждать колонии животных от вторжения нежелательных организмов вечно. Для того чтобы как можно дольше или, по крайней мере, до окончания эксперимента поддерживать здоровую популяцию животных необходимы квалифицированные научные сотрудники и подготовленный персонал.

При надлежащем оборудовании и уходе можно поддерживать удовлетворительное состояние здоровья колоний SPF-животных на протяжении нескольких лет. Но даже в оптимальных условиях статус здоровья колонии будет постепенно снижаться и приведет к необходимости вновь создать популяцию животных из свежего биоматериала. Перед тем как приступить к воссозданию колонии, необходимо предварительно тщательно вычистить и продезинфицировать отсек, в котором содержались животные. Хорошо оснащенная и действенная шлюзовая система и навыки персонала являются основной гарантией снижения риска проникновения инфекции в отсеки размножения животных и содержания особей, предназначенных для эксперимента.

Как уже упоминалось ранее, для создания здоровой группы животных с подтвержденным микробиологическим статусом для получения племенного потомства требуются квалифицированные специалисты, оборудование и гнотобиотная технология. При проведении работ по возобновлению популяции лабораторных SPF-животных необходимо также наличие лаборатории, осуществляющей генетический контроль. Поскольку внутреннее пространство изолятора ограничено (и в него можно поместить лишь определенное количество пар для получения потомства), для воссоздания колонии необходимо отбирать животных с учетом генетического профиля имеющихся лабораторных линий и будущей колонии.

Гнотобиотные животные-биомодели

Гнотобиология (от греческих слов gnotos— известный и biοs — жизнь) – раздел экспериментальной биологии, занимающийся получением и выращиванием стерильных животных (гнотобиотов), а также животных, микрофлора которых представлена одним или несколькими видами микроорганизмов. Гнотобиоты используются в ветеринарии для изучения болезней, сельскохозяйственных животных с невыясненной этиологией, а также для выяснения роли микробов в патогенезе многих болезней. На основе использования гнотобиологической техники проводятся работы по предупреждению инфекционных болезней сельскохозяйственных животных: создаются стада животных типа СПФ (без специфических патогенных факторов). Хозяйства, включающие СПФ стада, должны работать по типу закрытых предприятий со строгими ветеринарно-санитарными правилами режима хозяйства.

Безмикробные и гнотобиотические модели не являются альтернативой экспериментам с использованием обычных животных, это объекты, пригодные для специфических исследований.

Гнотобиология – это производство в научных целях биологических организмов – животных, растений и людей, наличие в которых полезных или нетипичных микроорганизмов полностью известно в пределах современной диагностики. Гнотобиотные животные могут быть:



безмикробными – то есть свободными ото всех видов микроорганизмов (вирусов, бактерий, грибков и паразитов), которые можно обнаружить современными методами диагностики;

моно-, ди- и полиассоциированными – в организме которых, присутствуют 1, 2 или несколько видов известных микроорганизмов ( изначально безмикробное животное, заселенное одним или более видом известных микроорганизмов).

Животные-гнотобиоты должны выращиваться в изоляторах. Изолятор должен обладать некоторыми обязательными признаками:



  • внутренняя поверхность и содержимое безмикробного пространства, клетки или помещения должны быть выполнены из безмикробных материалов и в нем должна поддерживаться безмикробная среда;

  • к внутреннему пространству изолятора и его содержимому должен быть обеспечен зрительный доступ;

  • необходимо наличие специальных приспособлений для манипуляций внутри изолятора, а также для помещения в него гнотобиотного содержимого извне без риска нарушения гнотобиотных условий;

  • должны быть оборудованы шлюзы для перемещения безмикробных животных и материалов в и из пространства без нарушения внутренних гнотобиотных условий;

  • во избежание нарушения безмикробных условий должна быть оборудована вентиляционная система, позволяющая проветривать пространство помещения и создающая внутри него положительное давление.

Производство безмикробных млекопитающих возможно благодаря тому, что эмбрион в чреве здоровой матери является микробиологически стерильным. Незадолго до окончания беременности плод может быть асептично извлечен посредством гистерэктомии или кесарева сечения и помещен в стерильный изолятор. Молодняк может быть вскормлен в изоляторе безмикробной приемной матерью или искусственным молоком по составу приближенным к натуральному. Данная процедура на сегодняшний день редко используется в лабораториях для получения гнотобиотных мышей и крыс, поскольку они есть в продаже. Популяции гнотобиотов должны включать в себя достаточное количество особей репродуктивного возраста для поддержания генетического однообразия потомства.

Производственные масштабы, необходимые для поддержания стабильного приплода безмикробных крыс или мышей выходит за рамки бюджета большинства исследовательских лабораторий.

Безмикробные животные видов иных, нежели мыши или крысы, должны выращиваться самим потребителем. Не представляет особой сложности получение безмикробных морских свинок, поскольку их детеныши достаточно развиты на момент появления, на свет и не требуют длительного, а иногда даже и вовсе, искусственного вскармливания. Низкие показатели выживания у кроликов. Кошек, собак и некоторые виды сельскохозяйственных животных можно вырастить безмикробными, но из-за их значительного размера, они представляют трудности для длительного содержания в изоляторах.


Каталог: doc
doc -> Английские слова и выражения в оригинальном написании a horse! a horse! MY KINGDOM FOR a horse! англ букв. «Коня! Коня! Мое царство за коня!»
doc -> Викторина по пьесе В. Шекспира «Гамлет, принц Датский»
doc -> Егемен Қазақстан. – 2014. №176. – 10 қыркүйек Біржан С. Елім менің – Қазақстан
doc -> Республиканский форум «Технологические инновации библиотек для информационного общества», Усть-Каменогорск, 10-11 октября 2012 г
doc -> Әож 373. 016;821. 512. 122 Қолжазба құқығында
doc -> Тест сынып Ұлы Отан соғысы нұсқа


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   4   5   6   7   8   9   10   11   ...   21


©kzref.org 2019
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет